德國默天旎推出新一代流式抗體(tǐ)——REAfinity流式抗體(tǐ),即Recombinant Engineered Antibody,此類抗體(tǐ)背景值低(dī),特異性好,解決了流式染色中的幾大(dà)問題,如同型對照難選、經常需阻斷Fc片段非特異性結合等難題。
1、什麽是REAfinity流式抗體(tǐ):
◆ 挑選最佳克隆号的抗體(tǐ),以該抗體(tǐ)序列作(zuò)為(wèi)改造的基礎,所以REA抗體(tǐ)親和(hé)力更高(gāo)、特異性更好;
◆該抗體(tǐ)是Fab段序列+ humanIgG1 Fc段序列;
◆ 抗體(tǐ)Fab段決定特異性,Fc段起骨架支撐作(zuò)用;
◆ 對Fc段序列進行(xíng)點突變,使其不會(huì)對Fcγ受體(tǐ)産生(shēng)非特異性結合;
◆ 抗體(tǐ)Fc段和(hé)Fc受體(tǐ)的非特異性結合是設置同型對照和(hé)封閉步驟的原因,改造或突變後就能消除這種非特異性結合的影(yǐng)響;
◆該重組序列通(tōng)過基因工程技(jì)術(shù),在HEK293細胞株中表達純化,相對于傳統的雜交瘤抗體(tǐ),純度更高(gāo)、特異性更好。
2、REAfinity抗體(tǐ)應用match示例
REA154抗體(tǐ)檢測鼠Dectin-1+細胞(特異性更好、染色指數(shù)更高(gāo))
REAfinity抗體(tǐ)不會(huì)對Fcγ受體(tǐ)産生(shēng)非特異性結合,無需封閉步驟,甚至可(kě)以不用同型對照。
3、REAfinity流式抗體(tǐ)優勢:
1)同型對照選擇極其簡單——通(tōng)用同型對照
所有(yǒu)REAfinity抗體(tǐ)的Fc段均為(wèi)human IgG1亞型;可(kě)以共用同一種同型抗體(tǐ)REA293。
由于胞內(nèi)抗體(tǐ)和(hé)表面抗體(tǐ)、human抗體(tǐ)和(hé)mouse抗體(tǐ)濃度有(yǒu)所不同,所以同一種同型抗體(tǐ)分為(wèi)四種:
· Human Surface REA293;
· Human Intracellular REA293;
· Mouse Surface REA293;
· Mouse Intracellular REA293;
客戶根據實驗選擇一類對應的熒光素即可(kě)。
2)更好的抗體(tǐ)純度,無批次間(jiān)差異
相對于傳統雜交瘤抗體(tǐ),基因工程抗體(tǐ)優勢明(míng)顯。