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牙刷是電(diàn)動好!那(nà)石蠟切片機呢?

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Leica有(yǒu)多(duō)種型号的石蠟切片機。常規石蠟切片有(yǒu)手動、半自動和(hé)電(diàn)動之分。價格也成梯度。

問:
那(nà)在選切片機的時(shí)候,要不要選一款電(diàn)動的呢?

目前,國內(nèi)外大(dà)多(duō)數(shù)的科研工作(zuò)者都以切片機預設的切片厚度值作(zuò)為(wèi)組織切片真實厚度的默認值,很(hěn)少(shǎo)有(yǒu)人(rén)探究組織切片厚度的變化可(kě)能會(huì)對觀察和(hé)評測結果造成多(duō)大(dà)影(yǐng)響。

 

實際中,同一組織樣本不同厚度的切片在顯微鏡下觀察時(shí),薄組織切片的顔色往往淡于厚切片,如果以鏡下觀察的顔色深淺來(lái)定性判斷被檢測化學物質 (包括抗原或抗體(tǐ))的有(yǒu)無,則可(kě)能因為(wèi)組織切片較薄而被認為(wèi)是陰性的結果。

 

同時(shí),組織切片較薄、顔色太淺不但(dàn)對組織細胞形态結構和(hé)化學物質的定位觀察産生(shēng)影(yǐng)響,而且更會(huì)因為(wèi)切片厚度的不恒定,可(kě)極大(dà)地動搖定量分析結果的可(kě)靠性。

 

即使在恒定切片機厚度刻度值的條件下手動切片,同一組織切片內(nèi)及相鄰的組織切片之間(jiān)也常會(huì)出現肉眼可(kě)見的表現為(wèi)顔色深淺不一的厚度差異。

 

切片厚度受制(zhì)片過程中多(duō)種因素的影(yǐng)響,例如:切片刀的鋒利程度、切片時(shí)的環境溫度、切片的速度、石蠟的熔點和(hé)硬度及韌性等。

 

下面就手動和(hé)自動兩種切片的厚度差異在這裏做(zuò)個(gè)介紹,這種差異的結果是經采用二次包埋法進行(xíng)重切片,用圖像分析儀測量組織切片的實測厚度,觀察組織切片實測厚度的變化而得(de)出的,其可(kě)為(wèi)組織、細胞的形态結構和(hé)化學物質的定性與定位觀察及定量分析結果的評價提供參考。 

  • 分析結果顯示:手動和(hé)自動切片對組織切片的實測厚度有(yǒu)顯著性差異 (p<0.05)組織種類對組織切片的實測厚度無顯著性差異 (p>0.05)。

     

  • 各組織切片的厚度測量均值均較切片機預設厚度值大(dà),同一切片機預設厚度值條件下,自動切片的實測厚度均值均小(xiǎo)于手動切片,且更接近切片機預設刻度值。

     

  • 相同組織的組織切片實測厚度的極端離散趨勢 (極差)随切片機預設厚度值的增加而呈現上(shàng)升趨勢,且手動切片組的極差大(dà)于自動切片組,但(dàn)兩組之間(jiān)的極差比較尚沒有(yǒu)統計(jì)學意義。

差異評估:

  • 盡管石蠟包埋組織切片的制(zhì)備方法已得(de)到不斷的改良定型,但(dàn)是,切片機預設的切片厚度值與組織切片的實測厚度值間(jiān)的差異情況仍不能為(wèi)人(rén)們所忽視(shì),它對評判組織細胞結構的形态和(hé)化學物質 (包括抗原或抗體(tǐ))有(yǒu)無和(hé)多(duō)少(shǎo)将産生(shēng)影(yǐng)響,應引起高(gāo)度的重視(shì)。

     

  • 切片機預設的切片厚度刻度值與組織切片的實測厚度值之間(jiān)有(yǒu)10%以上(shàng)的差異,切片機标示厚度與實測厚度間(jiān)的平均誤差為(wèi)17.2%

 

 

結論:
  • 實驗獲得(de)的組織切片厚度變化的研究結果表明(míng)切片機的切片厚度預設值低(dī)估了石蠟包埋組織切片的真實厚度,實驗切片機預設切片厚度與手動和(hé)自動切片厚度相差較大(dà)。

     

  • 其主要原因是由于切片機作(zuò)自動切片時(shí)其切片的速度恒定,石蠟包埋的組織受力均勻,而手動切片時(shí)的切片速度難以恒定,緻使石蠟包埋的組織受力不均勻,切片機的使用年限越久,活動機械連接的間(jiān)隙越大(dà),産生(shēng)實際切片的厚度大(dà)于或小(xiǎo)于切片機預設切片厚度的機會(huì)越大(dà)。

     

  • 如使用的切片機為(wèi)全新的,則實測切片厚度均大(dà)于而不小(xiǎo)于切片機預設切片厚度,而使用年久的手動切片機,其實測切片的厚度有(yǒu)不少(shǎo)小(xiǎo)于切片機預設切片厚度,這與上(shàng)述分析相吻合的。

 
 

 

結論
綜上(shàng)所述

實際操作(zuò)表明(míng)全自動切片機的切片速度快慢的設置與切片機輪轉速度有(yǒu)關,但(dàn)對石蠟包埋組織蠟塊切片瞬間(jiān)的速度并未産生(shēng)明(míng)顯影(yǐng)響。

 

手動切片的速度是以操作(zuò)者個(gè)人(rén)主觀感覺來(lái)控制(zhì)的,難以保證恒定的切片速度,其組織切片間(jiān)厚度的差異更大(dà),這與實驗結果的極差是相符的。

 

通(tōng)過觀察組織切片厚度的變化,發現不同切片方法對組織切片真實厚度有(yǒu)影(yǐng)響,自動切片的組織薄片的實測厚度與預設厚度刻度值的差異小(xiǎo)于手動切片,自動切片獲得(de)的組織切片的精度更高(gāo),優于手動切片。

 

因此,石蠟切片機的手動、半自動和(hé)自動切片機究竟該怎麽選呢?

隻要條件允許,盡量選擇一款優質的全電(diàn)動切片機!

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